Estudio del perfil transcriptómico de mejillones (M.galloprovincialis) sometidos a exposición con ácido okadaicocaracterización de las fosfatasas PP1 y PP2A

Resumo

El interés por la Transcriptómica en moluscos bivalvos se ha incrementado notablemente en la última década debido en gran parte al papel que estos organismos desempeñan en Acuicultura y a su utilización en el ámbito de la monitorización ambiental. Entre todos ellos, el mejillón es considerado un bioindicador o centinela de contaminación marina y actualmente existen diversos trabajos que evalúan los efectos desencadenados a distintos niveles en este organismo por la presencia de tóxicos en el medio. En este trabajo se estudiaron las diferencias existentes en el perfil transcriptómico de mejillones control respecto a mejillones incubados de forma controlada con el dinoflagelado Prorocentrum lima productor de ácido okadaico (OA). Para ello,se construyeron 8 genotecas de sustracción (SSH) pertenecientes a dos tejidos (branquias y hepatopáncreas) de mejillones control y tratados, con el objetivo de identificar una serie de genes sobrerrepresentados (en controles respecto a tratados y/o viceversa) que conforman la respuesta al OA. Además se evaluó la expresión génica a tiempo real (PCRRT) de 22 genes elegidos entre todos los obtenidos en las genotecas SSH. Con todo ello, se encontró que esta respuesta ante la presencia del tóxico ocurría de forma temprana y diferenciada según el tipo de tejido y la intensidad del tratamiento, aunque en general se trata de una respuesta de aclimatación sometida principalmente a dos frentes: procesos celulares relativos al citoesqueleto (transporte del tóxico), y procesos metabólicos relacionados con la detoxificación (eliminación del tóxico). Por otra parte, dada la ausencia de datos anotados sobre la secuencia de fosfatasas (PPs) en mejillón y debido al interés que suscita el fenómeno de inhibición que estas proteínas sufren por acción del OA, se caracterizaron varias subunidades de PPs en mejillón. Para ello, en este trabajo se partió de las secuencias correspondientes a PPs encontradas en las genotecas SSH que se extendieron por 3'-5'RACE. En concreto, se ha llevado a cabo la caracterización y el análisis filogenético de siete subunidades de las fosfatasas PP1 y PP2A aisladas y secuenciadas en Mytilus galloprovincialis expuestos y no expuestos a OA. Los resultados obtenidos no mostraron cambios significativos en la subunidad catalítica de PP2A y apuntaron a posibles diferencias en una de las subunidades catalíticas de PP1 identificadas.