Metabolismo del agua deuterada en higado de roedores, detectado por resonancia nuclear

Resumo

Se presenta un estudio del metabolismo a corto plazo del agua pesada (2h2o) en higado perfundido de roedores realizado con resonancia magnetica nuclear (rmn) y tecnicas metabolicas convencionales. Se perfundieron higados de rata o de raton con (13c) alanina en tampon krebs ringer bicarbonato conteniendo o no 50% 2h2o y se determino; (i) la cinetica de entrada de 2h2o en el higado, (ii) los efectos del 2h2o sobre el metabolismo de alanina y (iii) los intercambios de protones por deuterones del solvente. La entrada de 2h2o en higado, detectada por 2h rmn, siguio una cinetica biexponencial con constantes de velocidad de 9,6 y 96 s-1, respectivamente. La vida media del 2h2o en el higado fue de 10,4 ms. La sustitucion de 50% del agua del krb por 2h2o, redujo a la mitad los consumos hepaticos de oxigeno o alanina, disminuyo considerablemente la sintesis del glucogeno. Los espectros de 31p rmn tomados durante la perfusion indicaron que el 2h2o inhibe el descenso de phi causado por la alanina e induce la hidrolisis de fosfatidicolina. Los efectos del agua deuterada sobre el phi y sobre el metabolismo de fosfolipidos fueron similares a los inducidos por dids u ouabaina. Estos resultados sugieren que el 2h2o inhibe el antitransportador na+/h+ y no afecta a los transportadores hco3-/na+ y hco3 /ci o a la atpasa na+/k+. El analisis por 13c rmn de los desplazamientos isotopos y de de los acoplamientos 13c-2h revelaron un intercambio 1h-2h diferencial, dependiendeo de la naturaleza del metabolito y de la posicion del marcaje en 13c. Los isotopomeros (3-13c) aspartato mostraron relaciones 2h/1h similares en los carbonos c2 y c3, mientras que los isotopomeros (2-13c) aspartato tuvieron una relacion 2h/1h mucho menor en c2 que en c3. Estos resultados indican que los intercambios 1h-2h en las relaciones dehidratacion-deshidratacion del ciclo de krebs que produce el intercambio sobre el c3 de aspartato y glutamato son mas rapidos que los in