Desarrollo de metodologías analíticas basadas en el uso de compuestos orgánicos enriquecidos isotópicamente para su aplicación en química clínica y metabolómica

Resumo

El principal objetivo de la Tesis que se presenta es el desarrollo de metodologías analíticas basadas en el uso de compuestos orgánicos enriquecidos isotópicamente para su aplicación en Química Clínica y Metabolómica. En la Química Clínica, el análisis por dilución isotópica y espectrometría de masas (IDMS) es una técnica analítica ampliamente usada para la certificación de materiales de referencia y en ejercicios de intercomparación. Esta técnica se aplica al análisis de compuestos orgánicos utilizando trazadores enriquecidos en varios átomos de 13C, 2H, o 15N y la concentración del analito se obtiene a partir de la construcción de un calibrado metodológico lo que condiciona su aplicación al análisis de rutina. Por tanto, se requieren procedimientos alternativos basados en IDMS que impliquen la eliminación del calibrado con el correspondiente ahorro de coste y tiempo, posibilitando su aplicación en los laboratorios clínicos de rutina y además en los que estén corregidas todas las posibles fuentes de error. En Metabolómica, se necesita una medida exacta y precisa de la distribución isotópica para el estudio tanto de la regulación y comprensión de las rutas metabólicas, como de la biosíntesis de proteínas utilizando compuestos enriquecidos isotópicamente. La medida de la distribución isotópica en la investigación de las rutas metabólicas implica métodos basados en la integración de las áreas de pico de los diferentes isotopólogos o basadas en regresión lineal múltiple en los cuales se tienen que llevar a cabo complejos cálculos matemáticos para la corrección natural del 13C, mientras que en la biosíntesis de proteínas los cálculos implican complejos y tediosos procedimientos matemáticos que requieren el uso de ajustes polinómicos. Por lo tanto se requiere también el desarrollo de metodologías alternativas simples, novedosas, rápidas, exactas y precisas para el campo de la Metabolómica en estudios basados en el empleo de compuestos enriquecidos isotópicamente.