Genotipos de Streptococcus mutans de saliva y placa en escolares usando la técnica AP-PCR y el cebador OPA-2

Resumo

Se sabe que la colonización por Streptococcus mutans en niños ocurre en cuanto estos tienen dientes en boca y que esta es la bacteria más relacionada con el proceso cariogeno. Se ha conocido como primera ventana de infectividad, donde la transmisión vertical se ha demostrado. Posteriormente y mucho menos investigada que la primera se ha estudiado una segunda ventana e infectividad que parece estar íntimamente ligada con la erupción de la dentición permanente en la boca. Es aquí donde la posible transmisión horizontal cobraría especial interés. Nosotros hemos estudiado esa posible transmisión horizontal en escolares entre siete-siete años de edad. Seleccionamos dos colegios del distrito norte de Granada capital y el número total de niños que participaron fue de 75. Se les tomó muestras de saliva estimulada y placa de superficies lisas de molares e incisivos permanentes así como de placa de fosas y fisuras de molares permanente, realizandose una anamnesis y exploraciones bucodentales para recoger el estado de caries mediante odontograma según ele criterio de la OMS de 1997. Tanto una como otra muestra se inocularon en medio CRT(r)Bacteria par recuentos de estreptococos del grupo mutans (EGM) y lactobacilos (LB). También a partir de la saliva y de placas se efectuaron diluciones seriadas en tampós fosfato pH 7.3 y 0.05 M procediéndose a la siembra en placas con medio MSB. Tras incubación en anaerobiosis a 37ºC durante 48 horas, se seleccionaron, una media de 11.89 colonias pro niño con morfología compatible de ser EGM: pequeñas, medianas, azul oscuro, rugosas o lisas firmemente adheridas al agar. Dichas colonias se inocularon en caldo manitol para su posterior identificación bioquímica. Todas las cepas se conservaron liofilizadas y en glicerol al 50% a -80ºC. Una vez tomada una alícuota de este último, la extracción de ADN se realizó a partir de un cultivo de 24h en caldo Wilkins-Chalgren. Para la extracción de ADN se em