Generación y validación de un modelo animal ortotópico de cáncer de endometrio

Resumen

Introducción El cáncer de endometrio es el más frecuente de los tumores infiltrantes del tracto genital inferior femenino. El adenocarcinoma endometrioide representa el 80% de todos los carcinomas de endometrio. Otros tipos histológicos menos frecuentes son el seroso o el de célula clara. Los tumores de endometrio se clasifican en dos grandes grupos en función de variables clínicas, histopatológicas y de su perfil de alteraciones moleculares: el cáncer de endometrio endometrioide o tumores tipo I, y cáncer de endometrio no endometrioide o tumores tipo II. El síntoma guía del cáncer de endometrio es el sangrado vaginal, que está presente en el 90% de los casos. El tratamiento primario es quirúrgico, lo que permite un correcta estadificación de la enfermedad. La radioterapia externa es el tratamiento adyuvante que ha demostrado mejores resultados, disminuyendo la tasa de recurrencias loco-regionales. La quimioterapia está indicada en casos avanzados al diagnóstico o en las recidivas. Existen diferentes modelos animales preclínicos para terapias experimentales oncológicas. Los de inoculación pueden ser ectópicos, si se desarrollan mediante la implantación de células o de tejido tumoral fuera del órgano en el que producen el tumor en el humano, u ortotópicos, si la inoculación se realiza en el mismo órgano en el que se produce el tumor en el humano. El modelo ortotópico ha demostrado que produce invasión tumoral y generación de metástasis de forma similar a la observada en el humano. Objetivos Generar y caracterizar un modelo murino ortotópico de cáncer de endometrio a partir de tejido tumoral humano de carcinoma de endometrio endometrioide y a partir de la línea celular comercial de cáncer de endometrio Hec1A. Material y métodos 1. Línea celular. Se utiliza la línea celular comercial Hec1A transfectada con el gen de la luciferasa para generar células Hec1A-Fluc. 2. Animales. Se usan ratones hembras atímicos Swiss Nude y Balb-c Nude de 5 semanas. 3. Tejido tumoral endometrial. Se seleccionan dos muestras de tejido endometrioide a partir de cirugías que se realizaron por la Unidad de Ginecología Oncológica de Hospital Vall d’Hebron. 4. Técnica de inoculación. Se estudian dos vías de inoculación diferentes: la vía transmiometrial y la transvaginal. 5. Seguimiento. Se evalúa el seguimiento mediante bioluminiscencia in vivo en el modelo derivado de células Hec1A-Fluc, y mediante ecografía transabdominal y resonancia magnética en el modelo desarrollado a partir de tejido tumoral humano. 6. Necropsia, estudio mediante bioluminiscencia ex vivo, estudio histológico e inmunohistoquímico. Resultados La técnica de inoculación transmiometrial es superior a la transvaginal. En el modelo ortotópico derivado de células Hec1A-Fluc, el 85% de los animales que presentaron tumor endometrial generaron además implantes pélvicos, diseminación linfática en el 92% de los animales e implantes abdominales en el 75%. Las metástasis hematógenas a pulmón se detectaron en el 71% de los animales. En el modelo ortotópico derivado de tejido tumoral endometrioide, el 77% de los animales presentó diseminación en la cavidad pélvica, y el 66% presentó además implantes abdominales. Conclusiones 1. Es posible generar un modelo murino ortotópico de cáncer de endometrio a partir de tejido tumoral humano endometrioide. Su perfil histológico e inmunohistoquímico es similar a los tumores de endometrio tipo I. Su perfil de diseminación metastásica representa a un tumor localmente avanzado, con afectación pélvica y ganglionar. 2. Es posible generar un modelo murino ortotópico de cáncer de endometrio a partir de células Hec1A-Fluc. El seguimiento mediante bioluminiscencia in vivo permite el estudio del crecimiento del tumor y del perfil de desarrollo de metástasis. El estudio inmunohistoquímico del tumor es similar al del cáncer de endometrio tipo II. El patrón de diseminación representa a un tumor altamente metastásico, con diseminación linfática, transcelómica y hematógena.