Caracterización farmacológica del albendazol sulfóxido y de sus enantiómeros en ovejas y ratas. Análisis del metabolismo ruminal

Resumo

El objetivo principal del trabajo presentado fue analizar el comportamiento farmacologico de un antihelmíntico de la familia de los benzimidazoles, el albendazol sulfóxido (ABZSO) y de sus enantiómeros, evaluando su capacidad para atravesar la barrera placentária y causar embriotoxicidad y malformaciones congénitas. Para ello se estudió la cinética metabólica en fluido ruminal, utilizando un modelo de fermentadores de doble flujo, y la cinética plasmática en ovejas. Posteriormente se analizó el paso placentario de los enantiómeros de ABZSO en ovejas y las concentraciones embrionarias en ratas. Las muestras colectadas en estos procesos se analizaron mediante una técnica de HPLC (High Performance Liquid Chromatography) para cuantificar la presencia de netobimin (NTB), albendazol (ABZ), ABZSO y sus enantiómeros y el metabolito albendazol sulfona (ABZSO2). El estudio de las malformaciones externas se llevó a cabo por observación directa, mientras que las malformaciones esqueléticas se analizaron mediante tinción con rojo de alizarina S y posterior transparentación de los tejidos blandos. En los fluidos ruminales se observó un predominio de los procesos de reducción de NTB a ABZ y de ABZSO a ABZ en comparación con los procesos de oxidación de ABZ a ABZSO y de éste a ABZSO2. Por otra parte, no fueron observados procesos enantioselectivos en el metabolismo de los enantiómeros de ABZSO. En el plasma de las ovejas se observó un predominio del (+)-ABZSO, mientras que en la rata los dos enantiómeros presentaron un perfil cinético semejante, sugiriendo la existencia de diferencias entre especies. En estos estudios no se observaron diferencias relacionadas con el sexo y la gestación en el perfil farmacocinético de los enantiómeros de ABZSO en ovejas. También se ha observado que los dos enantiómeros tienen capacidad de atravesar la barrera placentaria de las ratas y de las ovejas en elevadas concentraciones y que la placenta de la oveja impedía en cierto grado el paso de estas moléculas hacia el feto. Asimismo se observó un elevado poder embriotóxico y alta capacidad teratógena del ABZSO cuando se administró la forma racémica. Cuando se administraron los enantiómeros por separado se pudo observar que los dos son buenos substratos de la sulfonación y que siguen un perfil cinético similar. Asimismo no se ha observado una reracemización, indicando este hecho una gran estabilidad de los enantiómeros de ABZSO y una baja capacidad reductora en los fluidos gastrointestinales de la rata. The main objective of this work was to analyse the pharmacological behaviour of a benzimidazole anthelmintic compound, albendazole sulphoxide (ABZSO) and its enantiomers, evaluating their ability to pass through the placental barrier and to produce developmental toxicity. The ruminal fluid kinetics of these compounds in artificial rumens, and the plasma kinetics in sheep was performed. The placental transfer and the embryo concentration of the ABZSO enantiomers were also studied in sheep and rats respectively. All the collected samples were analysed by HPLC (High Performance Liquid Chromatography) in order to determine netobimin (NTB), albendazole (ABZ), albendazole sulfoxide (ABZSO) and its enantiomers, and the metabolite sulfone (ABZSO2) concentration. The study of external abnormalities was performed by direct observation, whereas the skeletal malformation analysis was done using red alizarin S before transparentation of the smooth tissue. The reductive reations of the ruminal flora from NTB to ABZ and from ABZSO to ABZ were higher than the oxidation from ABZ to ABZSO and from ABZSO to ABZSO2. In other hand, no differences concerning the production or consumption of ABZSO enantiomers by the ruminal flora were observed, indicating that the ruminal bacteria metabolism was not enantioselective. In the sheep plasma there was a predominance of (+)-ABZSO, whereas in the rat plasma, both enantiomers showed similar kinetics profile, suggesting the existence of differences in ABZSO enantiomers plasma concentrations species. In our studies no pharmacokinetic differences of ABZSO enantiomers related to sex and pregnancy were observed in sheep. Both ABZSO enantiomers show the ability to pass through the placental barrier of rats and sheep, and that the sheep placenta impaired these compounds to reach the foetus. The ABZSO caused embrionary and teratogenic effects when administered in racemic form indicating that these effects were due to the presence of both enantiomers. When the enantiomers were administered separately, both enantiomers showed to be good substrates of sulfonation, and also to have a similar kinetic profile. Also, no reracemisation was observed after both enantiomers administration, indicating the high stability of ABZSO enantiomers, and the low reductive capacity of rat gastrointestinal fluid.